Manitoulin Island, Ø i Lake Huron, Ontario, Canada

Manitoulin Island er en ferskvandsø i Lake Huron i Ontario, Canada, der måler omkring 2.766 kvadratkilometer (cirka 1.068 kvadratmil). Øen rummer mere end hundrede mindre søer inden for sit landområde og er mod nord kantet af kalkstensklipper, der rejser sig over kystlinjen.

Arkæologiske fund på øen viser spor af menneskelig bosættelse, der går omkring ti tusind år før den fælles æra. Europæiske opdagelsesrejsende nåede øen i 1600-tallet og bragte handel og missionæraktivitet, før området senere blev en del af Canada.

Anishinaabe har boet på dette land i århundreder og kalder øen Mnidoo Mnis, hvilket betyder

Rejsende når øen via Little Current Swing Bridge, som er i drift hele året, eller ved at tage Chi-Cheemaun bilfærgen fra Tobermory mellem maj og oktober. Veje over øen egner sig til bilkørsel, cykling og gang, selvom nogle områder kan være sværere at få adgang til afhængigt af sæsonen.

Indlejret i øen ligger Lake Manitou, den største sø på en ferskvandsø nogetsteds i verden. Denne vandmasse dækker et betydeligt område og udgør et sjældent geografisk træk inden for ferskvandsriget.